【摘 要】
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本文旨在探讨siRNA干扰Smad 4基因对PanIN细胞体内外增殖及转移能力的影响,从而阐明PanIN恶性转化的新机制.通过构建和筛选能特异性静默PanIN细胞中Smad4表达的最佳siRNA稳定
【机 构】
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050000 河北医科大学第四医院急诊科(东院)
【出 处】
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第十五届全国临床肿瘤学大会暨2012年CSCO学术年会
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本文旨在探讨siRNA干扰Smad 4基因对PanIN细胞体内外增殖及转移能力的影响,从而阐明PanIN恶性转化的新机制.通过构建和筛选能特异性静默PanIN细胞中Smad4表达的最佳siRNA稳定表达质粒,稳定转染最佳siRNA表达质粒进入PanIN细胞,用Zeocin筛选稳定转染克隆,挑选阳性克隆、扩增,稳转后细胞命名为PanIN-S.运用细胞计数、克隆形成实验等分别比较两组在活细胞率和体外增殖能力的影响，Transwell和Mitigel assay检测其体外运动、侵袭能力。动物实验中，建立PanIN及siRNA干扰组PanIN-S细胞裸鼠移植瘤模型，随机分成两组，经组织病理学检测，测定并比较各组肿瘤体积、质量，并应用免疫组化方法检测并比较各组PCNA，VEGF和MMP-9的表达及其差异。结果表明体外证实Kras突变基础上小鼠PanIN细胞Smad4基因沉默促使PanIN细胞的恶性转化作用;PanIN基础上Smad4失活胰腺癌模型中体内外实验中，Smad4失活可显著促进小鼠移植瘤增殖及转移;其增殖及转移可能与PCNA、VEGF和MMP-9高表达有关。
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