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目的:制备抗脊髓灰质炎单克隆抗体。
方法:将脊灰减毒疫苗原液、灭活疫苗原液通过超滤、超离等方法纯化分别作为免疫抗原和检测抗原,减毒抗原免疫Babl/c小鼠得到的脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,灭活抗原建立间接ELISA方法筛选阳性细胞株。最终获得稳定分泌抗脊髓灰质炎病毒的杂交瘤细胞株,对抗体进行纯化和性质鉴定。
结果: 得到两株可稳定分泌抗脊髓灰质炎单抗的杂交瘤细胞株,命名为7G5及5E4细胞株;7G5单抗亚型为IgM,5E4单抗亚型IgG2a;相对亲和力5E4大于7G5单抗;两株单抗分别与脊髓灰质炎D抗原的VP2、VP3衣壳蛋白结合;两株细胞分泌的单抗识别相似表位。
结论: 成功制备了两株分泌抗脊髓灰质炎病毒的单抗。