新型呼肠病毒M基因重组真核质粒的构建及免疫效果研究

• 作 者: 胡燕[1]王睿林[2]侯俊[1]罗声栋[1]黄维芝[1]杨锐创[1]白冰珂[1]
• 机 构: 100039北京,解放军第三〇二医院实验技术研究保障中心
• 出 处: 第二届全国病毒感染与器官功能衰竭学术会议
• 发表日期: 2013年期

目的:研究新型呼肠病毒M基因在小鼠体内的免疫原性,包括体液免疫和细胞免疫.方法:扩增M1,M2和M3片段,并分别克隆至真核表达载体pcDNA3.1+,构建重组质粒,按照每只100μg的量免疫小鼠,对照质粒和PBS同时免疫作为阴性对照组.3次免疫后ELISA检测呼肠病毒特异性抗体水平,并对抗体亚型进行鉴定;ELISPOT检测淋巴细胞INF-γ的表达情况.结果:和对照组相比，3个重组质粒免疫的小鼠血清都有明显的R4特异性抗体升高，尤其以M3基因免疫后抗体水平最高，且以IgG2a占绝对优势;但其引发的细胞免疫应答较弱。而M2基因的重组质粒免疫小鼠没有较强的特异性抗体升高，但可以引发较强的细胞免疫应答。结论:M2重组DNA疫苗引起的Thl型为主的细胞免疫反应，M3重组DNA疫苗引起的Th2型为主的体液免疫反应。