【摘 要】
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目的：目前研究的纤维素酶产生茵主要为木霉、曲霉属真菌，对于水产动物肠道内产纤维素酶的菌株研究较少.本实验以海洋黄斑蓝子鱼(Siganus oramin)为实验对象，从其肠道中筛选
【出 处】
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中国生态学学会海洋生态专业委员会2012年学术年会
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目的：目前研究的纤维素酶产生茵主要为木霉、曲霉属真菌，对于水产动物肠道内产纤维素酶的菌株研究较少.本实验以海洋黄斑蓝子鱼(Siganus oramin)为实验对象，从其肠道中筛选纤维素降解菌，并对其进行16S rDNA的鉴定，为在水产养殖中的应用奠定相应的基础及研制鱼饲用微生态制剂打下基础.材料与方法：蓝子鱼在实验前先用绿藻浒苔(Enteromorpha prolifera)喂养四十天.喂养结束后用75％酒精擦拭鱼体后，无菌条件下取出肠道，剔除肠道外壁脂肪，取1g肠道并加入9mL 0.9％无菌生理盐水进行匀浆，然后进行10的倍数的梯度稀释，取合适的稀释梯度涂布于羧甲基纤维素钠的选择培养基平板上并涂布均匀，于37℃培养2～3d后挑去透明圈较大的单菌落划线，进行纯培养.结合刚果红平板上各纤维素分解菌单菌所产生的水解圈直径和菌落直径比的大小及DNS法测发酵液的酶活力的方法，对各纤维素降解菌进行复筛.结果：从蓝子鱼的肠道内共分离到纤维素降解菌39株，分别以B1～B39进行编号.发现菌株B13、B15、B25的酶活明显高于其他菌株，并对这三株菌的最佳产酶时间进行了测定，均在72h时发酵液的酶活力达到最高值，分别为0.436 U/ml、0.4057 U/ml、0.4281U/ml.对这三株菌进行16S rDNA的鉴定并提交至NCBI进行序列比对，发现B13与B15均与解淀粉芽孢杆菌的16S rDNA的序列的同源性达到99％，命名为Bacillus amyloliquefaciensB13与Bamyloliquefaciens B15；菌株B25的16S rDNA的序列与枯草芽孢杆菌的16S rDNA的序列的同源性达到99％，命名为B.subtilis B25.
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