【摘 要】
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诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cell，iPSCs)是目前细胞生物学和分子生物学领域的研究热点。本研究中，通过采用慢病毒感染的方法将含有Oct4，Sox2，Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞，获得了iPSCs。人的iPSCs在很多方面与人胚胎干细胞有相似性，比如细胞的克隆形态、生长特性、表面标志物、类胚体形成及体外定向诱导分化等方
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院整形外科 上海 200001,中国 上海交通大学医学院附属仁济医院,
【出 处】
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第六届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第三届中华医学会医学工程学分会干细胞工程专业委员会年会
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诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cell，iPSCs)是目前细胞生物学和分子生物学领域的研究热点。本研究中，通过采用慢病毒感染的方法将含有Oct4，Sox2，Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞，获得了iPSCs。人的iPSCs在很多方面与人胚胎干细胞有相似性，比如细胞的克隆形态、生长特性、表面标志物、类胚体形成及体外定向诱导分化等方面。我们在实验中发现：
①iPSCs的产生效率很低，大约在万分之几到千分之几之间;主要原因很可能与病毒转染这种基因导入手段的缺陷有关。②前3代细胞克隆传代时，细胞发生分化和凋亡的现象很多，很难扩增培养。针对这种现象我们在克隆传代时，培养基中添加了Y-27632，它是一种酪氨酸激酶抑制剂-ROCK(p160-Rho-associated coiled—coil kinase)，对胚胎干细胞的凋亡起决定作用。阻断ROCK的活化能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡，未处理细胞同处理细胞克隆形成率分别为1％和27％。③iPS细胞的体外定向分化的诱导体系和人类胚胎干细胞的分化极其相似，我们运用OP9细胞产生的条件培养液成功地建立了iPS细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。
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