【摘 要】
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禽流感病毒(AIV)亚型众多,变异频繁,现已发现16种不同的血凝素亚型(HA)和9种不同的神经氨酸酶亚型(NA),一般认为H5、H7亚型具有高致病力,并且发现H5,H7和H9亚型逐渐对人有感
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 农业部动物流感重点开放实验室 兽医生物国家重点开放实验室 哈尔滨 150001
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禽流感病毒(AIV)亚型众多,变异频繁,现已发现16种不同的血凝素亚型(HA)和9种不同的神经氨酸酶亚型(NA),一般认为H5、H7亚型具有高致病力,并且发现H5,H7和H9亚型逐渐对人有感染性。因此建立能迅速、有效的鉴别H5N1亚型及其它亚型禽流感病毒的检测方法对于防制禽流感具有重要意义.传统的病原分离,血清学诊断及RT-PCR方法无法实现对该病毒进行快速、准确、高通量检测分型的目的,因而迫切需要一种能够实现以上目的的新诊断技术.基因芯片技术在疾病诊断方面具有一定的优势,与传统检测方法相比,可在一张芯片上同时对多种疾病进行检测,待测样品用量小并且能特异性检测病原微生物的亚型及变异.本研究旨在构建并优化可灵敏区分禽流感病毒主要亚型的鉴别诊断基因芯片检测方法，研制可同时区分AIV的H5, H7, H9血凝素亚型及N1, N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。根据Genbank上公布的禽流感病毒序列，通过比对分析设计了针对禽流感病毒的M基因，H5, H7, H9亚型HA基因，N1, N2亚型NA基因以及看家基因GAPDH的特异性引物，并成功对目的片段进行了克隆,以重组质粒为模板，用PCR方法扩增制备点样探针.
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