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目的：观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DCs)中泛素和E3泛素连接酶在mRNA水平及蛋白水平的表达情况,初步探讨泛素-蛋白酶体系统在MODS中的表达和可能的泛素化调控作用。
方法：110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10天组和正常对照组,前5组实验小鼠采用腹腔注射酵母多糖法复制MODS模型(每组20只),正常对照组(10只)不做处理.使用磁珠和Mini MACS分选磁场分离出小鼠脾脏DCs,分别用Real Time PCR和Western Blot方法检测脾脏DCs中泛素和E3泛素连接酶的mRNA和蛋白表达变化规律及其与病程的关系。
结果：在MODS病程中脾脏DCs泛素mRNA的表达水平并无明显变化；脾脏DC E3泛素连接酶(包括MARCHI-MARCH8)mRNA的表达情况为其他6种E3泛索连接酶在MODS病程中均无明显变化,只有MARCHI和MARCH8mRNA表达水平在病程早期(1天)即显著下降达到最低值(P＜0.05),后随着时间的增加略有升高趋势,但到了病程终末的MODS期(10-12d)表达却再次下降,而其中MARCHI的变化最为显著；MARCHI蛋白的表达在病程早期(1天)即显著降低(P＜0.05),缓解期(7天)回升达到较高水平,而MODS期(10-12天)又开始下降。
结论：在MODS病程中,泛素-蛋白酶体系统中的E3泛素连接酶MARCHI表达有显著变化,MARCHI可能对脾脏DC产生泛素化调控作用,进而影响着DCs的免疫功能和MODS的整个病程。
方法：110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10天组和正常对照组,前5组实验小鼠采用腹腔注射酵母多糖法复制MODS模型(每组20只),正常对照组(10只)不做处理.使用磁珠和Mini MACS分选磁场分离出小鼠脾脏DCs,分别用Real Time PCR和Western Blot方法检测脾脏DCs中泛素和E3泛素连接酶的mRNA和蛋白表达变化规律及其与病程的关系。
结果：在MODS病程中脾脏DCs泛素mRNA的表达水平并无明显变化；脾脏DC E3泛素连接酶(包括MARCHI-MARCH8)mRNA的表达情况为其他6种E3泛索连接酶在MODS病程中均无明显变化,只有MARCHI和MARCH8mRNA表达水平在病程早期(1天)即显著下降达到最低值(P＜0.05),后随着时间的增加略有升高趋势,但到了病程终末的MODS期(10-12d)表达却再次下降,而其中MARCHI的变化最为显著；MARCHI蛋白的表达在病程早期(1天)即显著降低(P＜0.05),缓解期(7天)回升达到较高水平,而MODS期(10-12天)又开始下降。
结论：在MODS病程中,泛素-蛋白酶体系统中的E3泛素连接酶MARCHI表达有显著变化,MARCHI可能对脾脏DC产生泛素化调控作用,进而影响着DCs的免疫功能和MODS的整个病程。