【摘 要】
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目的：探讨FZH2基因促进卵巢癌侵袭转移的下游基因,及EZH2调控TIMP2基因的具体机制.方法：利用生物信息学的方法分析EZH2 mRNA的表达及其与卵巢癌预后及临床病理学特征的关系.利用生物信息学及组织芯片免疫组化检测分析EZH2与TIMP家族基因的表达相关性.利用shRNA及过表达质粒调控卵巢癌细胞中EZH2的表达,检测TIMP2蛋白及mRNA的表达改变及其下游基质金属蛋白酶MMP2、MMP
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科
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目的：探讨FZH2基因促进卵巢癌侵袭转移的下游基因,及EZH2调控TIMP2基因的具体机制.方法：利用生物信息学的方法分析EZH2 mRNA的表达及其与卵巢癌预后及临床病理学特征的关系.利用生物信息学及组织芯片免疫组化检测分析EZH2与TIMP家族基因的表达相关性.利用shRNA及过表达质粒调控卵巢癌细胞中EZH2的表达,检测TIMP2蛋白及mRNA的表达改变及其下游基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的活性变化.利用MSP法检测卵巢癌细胞株中TIMP2的mRNA表达与其启动子甲基化水平的相关性,分别用5Aza和GSK126药物处理卵巢癌细胞,检测TIMP2基因的表达改变及其启动子甲基化水平的改变.ChlP实验分析验证FZH2是否通过DNA甲基化和H3K27me3的表观遗传学机制调控TIMP2的表达.结果：数据库分析显示EZH2在卵巢癌中高表达并与肿瘤转移密切相关,数据库分析及组织芯片免疫组化分析均显示EZH2与TIMP2的表达呈负相关.上调EZH2的表达能抑制TIMP2的表达、增加MMP的表达,继而促进卵巢癌细胞的侵袭迁移能力；而下调EZH2使TIMP2的表达增加、抑制MMP的酶活性,进而抑制卵巢癌细胞的侵袭迁移.在卵巢癌细胞株中TIMP2的mRNA与其启动子甲基化水平呈负相关,抑制DNA甲基化和H3K27的三甲基化均能抑制TIMP2启动子的甲基化并增加其表达水平.EZH2和H3K27me3能直接结合于TIMP2的启动子区域,EZH2高表达时TIMP2启动子区域的H3K27me3和DNA甲基转移酶募集增加.结论：FZH2通过H3K27me3和DNA甲基化的表观遗传学机制抑制TIMP2的表达,激活MMP2、MMP9的酶活性,从而促进卵巢癌细胞的侵袭和迁移.
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