库尔勒香梨离体叶片再生体系的建立

• 作 者: 钟颖 冯建荣 任欢喜 张秀抗 许竹叶
• 机 构: 石河子大学农学院特色果蔬栽培生理与种质资源利用兵团重点实验室
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 库尔勒香梨 无菌叶片 愈伤组织 不定芽 生根
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31272129)

建立并优化库尔勒香梨的再生体系,以期为梨的遗传转化研究奠定基础。以库尔勒香梨离体培养的继代30 d左右的无菌苗叶片为材料,1/2MS为基本培养基,用TDZ(1.0 mg·L^-1)与IBA(0.3⁰.9 mg·L^-1)或NAA(0.3⁰.9 mg·L^-1)分别组合设计配方,通过比较愈伤组织诱导率和不定芽再生率,优化适宜叶片脱分化形成愈伤组织及愈伤组织再分化诱导不定芽的生长调节剂的配比,选取不定芽再生最优配方附加不同质量浓度的AgNO₃(0、0.5、1.0 mg·L^-1)。用IBA(0.5 mg·L^-1)和NAA(0.3、0.6、0.7、0.9、1.1、1.4 mg·L^-1)分别组合设计生根生长调节剂的配比,暗培养7 d,根据生根率、平均生根数以及平均生根长度筛选最适宜生根的生长调节剂配比,建立生根的培养体系。结果表明,当TDZ浓度为1.0 mg·L^-1时,愈伤组织诱导率和不定芽再生率随IBA的质量浓度升高先增加后下降,在0.5 mg·L^-1IBA时愈伤组织诱导率和不定芽再生率均为最高值,愈伤组织诱导率均为100%,不定芽再生率为74.44%;同样TDZ浓度时,愈伤组织诱导率和不定芽再生率随NAA的质量浓度上升也呈现先上升后下降的趋势,在0.6 mg·L^-1NAA时愈伤组织诱导率达到100%,不定芽再生率达到71.11%。在两个优选配方中添加0.5 mg·L^-1AgNO₃时,TDZ为1.0 mg·L^-1,IBA为0.6 mg·L^-1时,不定芽再生率达到84.92%;而TDZ和NAA组合的配方添加AgNO₃不定芽再生率并没有提高。在暗培养7 d,IBA为0.5 mg·L^-1时,生根率随着NAA浓度的升高呈先升高后下降的趋势,在浓度为0.9 mg·L^-1时达到峰值,为100%,平均生根条数为5.66,平均根长为2.8 cm。库尔勒香梨叶片诱导不定芽再生的最佳培养基为1/2MS+TDZ 1.0 mg·L^-1+IBA0.5 mg·L^-1+AgNO₃ 0.5 mg·L^-1,愈伤组织诱导率100%,不定芽再生率84.92%。最适宜香梨再生苗生根的培养配方是:1/2MS+0.5 mg·L^-1IBA+0.9 mg·L^-1NAA,结合前期暗培养7 d,生根率可达100%。