【摘 要】
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[目的]构建新疆出血热病毒(XHFV)糖蛋白2 个抗原区段的DNA 疫苗,并观察其免疫应答效果.[方法]分别将XHFV 糖蛋白Gc 上的2 个区段aa 180-300 和aa 407-530 编码的DNA 序列
【机 构】
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新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046
【出 处】
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新疆动物学会2016年学术研讨会暨第七届青年学术论坛
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[目的]构建新疆出血热病毒(XHFV)糖蛋白2 个抗原区段的DNA 疫苗,并观察其免疫应答效果.[方法]分别将XHFV 糖蛋白Gc 上的2 个区段aa 180-300 和aa 407-530 编码的DNA 序列插入真核表达载体pVAX1 中,构建真核质粒pVAX1-Gc180-300 和pVAX1-Gc407-530,经酶切和测序鉴定后,通过尾静脉注射小鼠,取鼠肝脏通过RT-PCR 法分析目的基因的表达；免疫小鼠后通过T 细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA 法检测抗体对其诱导的免疫应答效果进行评价.[结果]经双酶切鉴定和测序证实重组质粒构建正确,且目的基因能够在小鼠肝脏中瞬时表达；pVAX1-Gc407-530免疫组小鼠的血清抗体效价可达1：1600,小鼠脾脏T 淋巴细胞增殖明显,IFN-γ 的表达水平也高达160.27 pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义(P < 0.01).[结论]成功构建XHFV 糖蛋白2 个抗原区段DNA 疫苗,目的基因能够在mRNA 水平表达；各免疫组均激起了较强的体液免疫及细胞免疫应答,pVAX1-Gc407-530 免疫组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗.
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