脂多糖调控肺成纤维细胞Thy-1及整合素β3表达并抑制自噬的观察性研究

来源 :中国医师协会麻醉学医师分会2018年年会、第二十次全军麻醉与复苏学学术年会、2018年云南省医师协会麻醉学医师分会年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:eworld5008
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明确脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1(thymocyte differentiation antigen,Thy-1)和整合素β3蛋白表达的调控作用,并观察其与自噬抑制的关系.将原代培养的小鼠肺成纤维细胞接种于六孔培养板,密度4*105个/ml.待小鼠肺成纤维细胞贴壁后,更换无血清培养基饥饿过夜,将其随机分为四组(n=3):PBS对照组(Con.组)、0.25μg/ml LPS组(LPS0.25组)、0.50μg/ml LPS组(LPS0.50组)、1.00μg/mlLPS(LPS1.00组),分别加入PBS以及以上终浓度的LPS,刺激小鼠肺成纤维细胞6小时后,提取细胞总蛋白,比较不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞6小时后Thy-1和整合素β3的蛋白表达情况.随后将小鼠肺成纤维细胞随机分为两组(n=3):PBS对照组(Con.组)、1.00μg/ml LPS(LPS1.00组),分别加入PBS以及以上终浓度的LPS,刺激小鼠肺成纤维细胞6小时后,提取细胞总蛋白,比较不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞30小时后自噬相关蛋白LC3和Beclin-1的表达情况,同时通过透射电镜观察小鼠肺成纤维细胞内自噬小体的形成情况.
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