间日疟原虫谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达

来源 :第三届北京热带医学与寄生虫学论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joy2000
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目的 克隆表达间日疟原虫谷氨酸脱氢酶.方法:根据推测的PvGDH编码基因设计特异性引物,采用PCR自构建的中国红内期间日疟原虫全长cDNA文库扩增PvGDH编码基因,将其克隆至pMD 18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定后,亚克隆至pCOLD Ⅱ载体进行表达.通过ELISA和Western-blot检测正常人血清、间日疟患者血清、恶性疟患者血清与rPvGDH的免疫反应性;以表达的rPvGDH免疫小鼠制备抗血清,通过ELISA检测抗血清与rPvGDH的免疫反应性;并以Western-blot检测抗血清与间日疟原虫抗原、恶性疟原虫抗原、正常红红细胞抗原的免疫反应性.
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