【摘 要】
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在确保高得率的前提下,将膜分离技术和色谱技术耦合在一起.多种分离手段的结合,大大缩短了纯化过程,为快速高效的获取高纯度的鼠妇纤溶酶PSL Tro01提供了保障.（1）从1 867.2 mg
【机 构】
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南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心; 南京中医药大学江苏省植物药深加工工程研究中心; 福建医科大学; 陕西中医药大学陕西省中药资源产业化过程协同创新中心;
【基金项目】
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国家十二五重大新药创制专项(2011ZX09401-308-8);国家自然科学基金项目(81274096);江苏省科技厅重点研发计划-社会发展面上项目(BE2016754);江苏省六大人才高峰项目(2014-YY-014);江苏省中药资源产业化过程协同创新中心重点项目(ZDXM-6,ZDXM-8)
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在确保高得率的前提下,将膜分离技术和色谱技术耦合在一起.多种分离手段的结合,大大缩短了纯化过程,为快速高效的获取高纯度的鼠妇纤溶酶PSL Tro01提供了保障.（1）从1 867.2 mg鼠妇粗蛋白中分离纯化得到0.36 mg溶纤活性蛋白,其相对效价为1 471.9 Uint/mg,回收率为6.7%,纯化倍数为342.3;（2）纯化样品通过HPLC（液相色谱）检测,得到一个对称峰,其峰面积积分结果表明分离纯化所得到的鼠妇纤溶酶纯度为90.9%;（3）PSLTro01经过SDS-PAGE,蛋白的相对分子质量约为38k,与MALDI-TOF MS质谱法测定结果一致38 497.85;（4）PSLTro01的N-端前15个氨基酸序列测定结果为:NH2-Asp-Ile-Asn-GlyGly-Gly-Ala-Thr-Leu-Pro-Gln-Pro-Leu-Tyr-Gln,即氨基酸序列的简化形式为DINGG GATLP QPLYQ,与NCBI数据库里所收录的所有蛋白的氨基酸序列均不匹配,表明PSLTro01为一个全新的蛋白.
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