【摘 要】
：
选取约3 月龄南方鲇(Silurus meridionalis Chen)卵巢组织,经胶原蛋白酶IV 及胰蛋白酶消化,用含15％胎牛血清、25mM Hepes、1％非必需氨基酸、0.5mMβ-巯基乙醇、10ng/ml碱性
【机 构】
：
淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,西南大学生命科学学院,400715
论文部分内容阅读
选取约3 月龄南方鲇(Silurus meridionalis Chen)卵巢组织,经胶原蛋白酶IV 及胰蛋白酶消化,用含15％胎牛血清、25mM Hepes、1％非必需氨基酸、0.5mMβ-巯基乙醇、10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子、1 ng/ml白血病抑制因子、500U/ml青霉素及链霉素的L-15培养基于28℃培养,通过细胞增殖检测、染色体核型分析、RT-PCR、细胞转染等方法对其生物学特征进行初步研究.结果表明：卵巢细胞分离培养18d后,开始用胰蛋白酶消化、传代培养,传代后细胞呈成纤维样生长,初期细胞生长较为缓慢,平均7-10d传代一次,传至第10代后,细胞生长加快,平均3-5d传代一次； 5-乙炔基-2-脱氧尿苷(EDU)掺入法检测第25代细胞在孵育12、24 h 后的标记指数分别为23.0％和38.0％；经12个月的继代培养,现细胞已稳定传至第67代,将其命名为SCOC.对传至第23、28、34代的SCOC染色体核型分析结果表明,80％以上细胞染色体数为50-65,其中,2n=58的分裂相占61％,表明SCOC具有正常二倍体核型.RT-PCR 检测结果显示,SCOC表达Foxl2、Sf1 和Wt1b,不表达Vasa、Wt1a、Cyp19a1a和3β-HSD,初步推测其为南方鲇卵巢颗粒细胞系.用TransIT？-2020进行pIRES-GFP转染,约15％的细胞观察到明显绿色荧光.用EDU 掺入法检测雌激素(17β-雌二醇,E2)对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测结果显示,200 nM E2 可显著促进其增殖,EDU 标记指数为35.3％,而对照组为18.3％,二者具有极显著差异.该细胞系的建立不仅为南方鲇性别决定、分化及其相关基因的功能研究提供了必要的平台和工具,而且为内分泌激素的调控研究、环境内分泌干扰物的检测、鱼类病毒分离培养等奠定了重要基础.
其他文献
尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)是重要的世界性养殖鱼类,雄鱼比雌鱼长的快,其基因组已公布,进行全雄研究和性别分化控制研究具有重要意义.鱼类有两类芳香化酶基因,即
基本医疗保险改革方案出台在即,很多热门话题也随之而来。人们在普遍关注的医保改革方案所产生哪些影响时,殊不知,一个前景广阔的就业机遇正悄然降临。可以预见。四种人才在
近年,自国际画坛大量使用丝网印刷复制有界限油画、粉画和装饰画以来,丝网版画艺术也常与丝印美术复制品的贬称——Cheap(便宜货)联系在一起。虽然这里有着误解和附会的成份,
GSDF(gonadal soma-drived factor)是在真骨鱼类辐射基部所发生的基因组复制而产生的新基因,是转化生长因子TGF-β 超家族的一个新的成员,且在真骨鱼类精巢分化、原始生
An optical routing-switching technology based on optical switch array is proposed.The characteristics of the blocking and nonblocking networks are analyzed and
两性异形(Sexual Size Dimorphism,SSD),即雌雄两性在个体大小上的差异,是一种普遍和重要的生物学现象。两性异形发生的原因是进化生物学的重要研究内容,传统的理论和研
随着人民生活水平的提高,我市居民一改往常习惯,改吃本地小白茶为矮萁小青菜。矮萁系列品种因食味浓、品质好、植株矮小、束腰美观,而深受市民欢迎。其价格一般比本地小白菜
出生于爱尔兰的皮尔斯·布洛斯南,是一位戏剧科班出身的演员,现年42岁,身高1.88米,魅梧英俊,从艺多年,演技纯熟,去年初,他在伦敦丽晶酒店举行的记者招待会上,宣布签约成为新
Downslope windstorm is a disastrous weather phenomenon,it may occur in stable atmospheric condition when airflow pass over the mountain of moderate height.E
一、速冻香椿:将香椿洗净、晾去表面水分,用塑料保湿袋包好,放在冻结装置内快速冻结,在40～60分钟内迅速达到-35℃.冻结后,就可装箱外运销售.解冻后食用,味道同鲜椿芽一样鲜美.