人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响及相关基因的时序表达

来源 :第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Colo
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目的:探讨人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)诱导分化的影响及相关基因的时序表达。 方法:体外分离培养人类MSCs,传至第四代加入自体心肌匀浆上清液,持续作用两周,相差显微镜下观察MSCs形态变化,免疫荧光方法鉴定心肌特征性肌动蛋白α(α-actin)和肌钙蛋白(cTnT)的表达,应用半定量RT-PCR技术分析Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC、cTnT等相关基因在分化过程中的动态时序表达。 结果:经心肌匀浆上清液诱导后,MSCs体积变大,立体感增强,形态近似棒状。诱导两周时α-actin及cTnT阳性细胞比例分别为25.53%和23.48%。Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C基因在诱导后三天表达开始增强,其中GATA-4、MEF-2C诱导后五天达高峰,以后维持在较高水平,Nkx-2.5则随诱导时间逐渐增强;α-MHC、cTnT基因诱导前无表达,于诱导第三天出现表达,以后维持在高水平。 结论:心肌匀浆上清液对MSCs具有定向诱导作用,在此过程中,伴随着Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC和cTnT基因的时序表达变化。
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