【摘 要】
：
本研究建立了一种同时检测PCV2，PPV和PRV的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2，PPV和PRV基因序列，针对各自保守区PCV ORF2、PPV VP2和PRV gH各设一种特异性引物。首先进行单重PCR条件优化，然后再进行两重PCR条件优化，最后进行三重PCR条件优化，在同一样品中同时扩增PCV2，PPV和PRV三种炳毒的特异性片断，长度分别为950bp(PCV2)，490b
【机 构】
：
山东省日照市畜牧局,山东 日照 276800 郑州牧业工程高等专科学校,河南 郑州 450011
【出 处】
：
河南省畜牧兽医学会第七届暨2008年学术研讨会理事会第二次会议
论文部分内容阅读
本研究建立了一种同时检测PCV2，PPV和PRV的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2，PPV和PRV基因序列，针对各自保守区PCV ORF2、PPV VP2和PRV gH各设一种特异性引物。首先进行单重PCR条件优化，然后再进行两重PCR条件优化，最后进行三重PCR条件优化，在同一样品中同时扩增PCV2，PPV和PRV三种炳毒的特异性片断，长度分别为950bp(PCV2)，490bp(PPV)和372bp(PRV)。该多重PCR技术能检出PCV，PPV和PRV最终浓度分别为1.4 pg/l，0.22pg/l和34.7pg/l。该方法的建立对临床上进行这三种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。
其他文献
在番茄生长过程中，营养元素(如：氮、磷、钾)供应的均衡对其生长有着重要的影响。文中介绍了传统营养元素诊断方法和近红外光谱技术在农业检测中的应用特点，并对新近发展起来的Monte Carlo仿真方法和在线动态漫反射光谱检测法进行了简要分析，通过应用这些方法，可以建立番茄的营养元素供应模型，并分析营养元素与近红外光谱之间的内在关系。
本文根据品种、胎次、日龄、体重尽量一致的原则，选择健康无病体重9kg左右的杜长大三元杂交仔猪48头(阉公猪和小母猪各半)，试验采用4处理3重复单因子完全随机设计。对照组喂基础饲粮，试验组是在对照组日粮的基础上分别添加0.25％(试验Ⅰ组)、0.50％(试验Ⅱ组)和1.00％(试验Ⅲ组)的苜蓿皂甙，探讨了苜蓿皂甙对断奶仔猪血清生化指标、血清激素和抗氧化性的影响，结果显示苜蓿皂甙能够对它们产生影响。
@@球虫病是一种对家禽生产有巨大影响的寄生虫病。据估计每年世界范围内球虫病所耗费用大约是8亿美元，美国肉鸡业球虫病所耗费用大约是4亿5千万美元。这些费用包括添加于饲料中预防肉鸡和肉种鸡球虫病的费用，预防失败而更换治疗药物的费用，以及由于发病、死亡和暴发球虫病之后存活鸡较低的饲料转化率。
本文从哺乳动物早期胚胎的损伤，即透明带、染色体、超微结构的变化以及细胞骨架损伤等方面阐述了冷冻对哺乳动物胚胎的超微结构的影响，并提出胚胎冷冻亟待解决的问题，以及将来的发展可能性。
为了提高乳腺上皮细胞(MGE)核移植的电融合效率，本实验以PHA处理融合前的核质重组体，并用微电极挤压融合法(pMEF)来融合MGE重组体，PHA未处理组及槽式融合法作为对照。实验通过测定PHA对孤雌激活胚发育力的影响来确定PHA的最佳使用剂量及作用时间，结果，100 μg/mL和20 min是合适的作用浓度和时间，用于后面的核移植实验：PHA处理重组体显著提高了槽式融合法的融合率(52.82％，
为了研究有效的疫苗免疫增强佐剂以预防和治疗鸡免疫失败病，设计引物扩增、克隆鸡白细胞介素-6(ChIL-6)成熟肽基因并进行原核表达，对表达的融合重组蛋白(rChIL-6)通过尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化，通过测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞增殖活性来评估蛋白的生物学活性;将120只SPF鸡平均分成12组，分别接种NDV活疫苗、AIV H5N1灭活疫苗以及NDV、AIV
本研究参考GeneBank发表的传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组序列，设计并合成了一对特异扩增IBDV VP2基因高变区的引物。应用RT-PCR法，对分离于信阳地区典型发病鸡群的IBDV(XX株)进行了VP2基因高变区的克隆与序列分析，并和相关毒株进行了比较。结果表明，XX株与超强毒株UK661、OKYM高度相似，核甘酸同源性分别为98.73％、99.15％，氨基酸同源性都为100％，而与经典
本研究将法氏囊病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2展示到T7噬菌体表面，重组噬菌体用PEG沉淀法纯化后用FITC标记，并用此标记的噬菌体与病毒受体细胞法氏囊B细胞结合，荧光显微镜下观察。结果展示有IBDV VP2蛋白的噬菌体经FITC标记后仍然具有与受体细胞结合的特性，荧光显微镜下可见明显绿色荧光。说明将FITC标记与噬菌体展示技术相结合的方法，可使荧光标记的噬菌体作为体外呈像的显像剂，使该技术在配体/
ORF6是猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)编码膜蛋白(M蛋白)的基因，其编码的膜蛋白免疫原性强且高度保守。为了构建PRRSV ORF6基因的真核表达载体，本研究以P质粒作为模板，通过聚合酶链式反应(PCR)扩增0RF6基因、回收PCR产物，对回收产物和pVAXJ载体进行双酶切(Nbel、EcoRI)，将酶切后的ORF6基因片段与pVAXI载体连接、转化细菌，经抗性筛选、碱裂解法提取质粒、双
MC5R基因是黑素皮质素受体家族的一员，与动物肥胖相关。本研究利用PCR-RFLP技术对该基因在猪7个不同群体的多态性进行了检测，发现在大白、梅山、大梅和梅大群体只有AA型，长大只有AB型，在长白猪群体则3种基因型均有分布。