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目的 运用DHPLC和直接测序的方法分析研究中国EOPD患者parkin和PINK1基因点突变情况,以及运用实时定量PCR分析parkin基因外显子重排突变,并探讨PD患者基因型与临床表型之间关系.方法 按照以下标准在浙江大学医学院附属第二医院神经内科收集69例EOPD患者,(1)发病年龄小于50岁；(2)至少具备帕金森病四项特征性症状中两项(静止性震颤、运动迟缓、肌肉强直、姿势障碍)；(3)对左旋多巴治疗有好的反应；(4)排除由其他神经系统疾病或药物或毒性物品引起的继发性帕金森病患者.首先,采用实时定量PCR的方法检测parkin基因12个外显子的重排突变；对没有重排突变或只有杂合重排突变的外显子再作DHPLC分析和直接测序排除parkin基因点突变；最后,对仍未查到突变或只有杂合突变的病例作DHPLC分析和直接测序筛查PINK1基因的点突变.结果 第一：应用荧光定量PCR方法发现19例PD患者具有parkin基因不同外显子的重排突变.其中,M630和M631患者为两姐妹都为3号、4号和7号外显子的杂合缺失；M5患者含有3号和4号外显子的纯合缺失；M6患者含有2号、6号外显子的杂合缺失；M10患者含有4号外显子纯合缺失；M30患者6号外显子杂合缺失和1 1号外显子杂合重复；另外,6例患者含有单一外显子的杂合缺失；7例患者含有单一外显子的杂合重复.第二：应用DHPLC和直接测序的方法在一例患者的parkin基因上发现一新的呈杂合状态的单一碱基变异位点c.2T＞C (p.M1T),另外,在parkin和PINK1基因上发现多个SNPs.第三：临床上,在含有纯合突变或复合杂合突变的患者中,其PD起病时常为双侧对称出现症状,如抖动、肌肉强直、运动迟缓.有突变(包括单一杂合突变)的患者起病年龄明显早于不含突变的患者.结论 第一：在本组患者中,parkin基因的突变率为28％,低于大多文献报道的50％,很可能是因为我们选的患者多是散发性的,而不是家族性PD.第二：除了SNP外,本研究在PINK1基因上没有发现突变,这正是说明了PINK1基因的低突变率,而且在我国的PD患者中尤为低.第三：有parkin基因突变的患者除了PD起病年龄明显早于无parkin基因突变的患者外,没有其他区别于无parkin基因突变患者的特异临床症状,所以从临床表现上无法去判断PD患者是否含有parkin或PINK1基因的突变.