【摘 要】
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目的 近几年已有研究表明Ⅱ 型糖尿病患者血清Ficolin-3 水平相对正常人显著上调,有望作为检测Ⅱ 型糖尿病的生物标记物.目前针对血清Ficolins 的检测方法中,Western Blo
【机 构】
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中国科学院上海高等研究院,201210
【出 处】
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2015年中国生物医学工程联合学术年会
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目的 近几年已有研究表明Ⅱ 型糖尿病患者血清Ficolin-3 水平相对正常人显著上调,有望作为检测Ⅱ 型糖尿病的生物标记物.目前针对血清Ficolins 的检测方法中,Western Blot 定量结果不准确、操作复杂、重现性不理想,稳定性差；ELISA 法则操作步骤繁琐且成本高.本文开发了一种操作简便,灵敏度高,检测时间短的电化学免疫传感器,为检测Ficolin-3 提供一种新方法.方法 利用静电吸附原理将Ficolin-3 鼠抗人单克隆抗体固定在玻碳电极表面,制备免疫电极,可用于捕获血清样本中Ficolin-3.再将生物素标记的Ficolin-3 羊抗人多克隆抗体滴涂于工作电极表面孵育,再加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶.最后,通过循环伏安法和稳态时间电流曲线法表征免疫电极的性能.结果 在优化的免疫反应条件及电化学检测条件下,获得的免疫电极线性检测范围为100 ng/mL 到50μg/mL.对正常人和Ⅱ型糖尿病患者血清Ficolin-3 进行检测并和标准ELISA 方法对照,结果吻合.结论 用玻碳电极做传感界面,研制的Ficolin-3 电化学免疫传感器具有灵敏度高、准确性强和反应时间短的特点,在制备操作、稳定性等多方面都有很大的改善,为临床免疫分析及临床检测提供了一种快速、新颖、简便的方法.
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