【摘 要】
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目的探讨携p-选择素单抗的超声造影剂在动脉粥样硬化中的诊断价值。方法采用机械振荡法及"亲和素-生物素"桥接法制备携带p-选择素(p-selectin)的脂质超声微泡造影剂,用DFY-Ⅱ
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院超声科 超声影像学研究所(400010)
【出 处】
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2012中国·北京超声医学学术大会
论文部分内容阅读
目的探讨携p-选择素单抗的超声造影剂在动脉粥样硬化中的诊断价值。方法采用机械振荡法及"亲和素-生物素"桥接法制备携带p-选择素(p-selectin)的脂质超声微泡造影剂,用DFY-Ⅱ型超声图像定量分析诊断仪检测微泡粒径,计算其浓度。应用激光共聚焦法检测抗体与微泡连接情况。体外实验中,将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)接种于6孔板中,随机分为以下4组:①HUVEC+普通微泡组②HUVEC+靶向微泡组③经IL-4刺激后的HUVEC+普通微泡④经IL-4刺激后的HUVEC+靶向微泡。免疫组化检测IL-4处理后的HHUVEC中p-selectin的表达。荧光显微镜和细胞计数仪检测符绢微泡与细胞的结合率。SD大鼠25只,高脂饮食建立腹主动脉硬化模型,随机分成5组。第1、2组普通饮食大鼠分别使用普通、靶向造影剂,第3、4组高脂饮食大鼠分别使用普通、靶向造影剂,第5组高脂饮食组先使用普通造影剂造影后,生理盐水冲洗后再使用靶向造影剂造影。采用视频密度法和免疫组化检测靶向微泡与受损血管内膜结合能力。结果成功构建携p-selectin单抗的靶向超声微泡,其大小、粒径及分布与普通超声微泡相似。体外实验中,HUVEC受到IL-4刺激处理后,细胞膜上有效表达p-selectin,可见大量携p-selectin单抗靶向微泡与刺激后HUVEC紧密结合,仅有少量靶向微泡与正常HUVEC结合。体内试验中,第4组与1、2、3组间血管内膜、斑块峰值视频密度的差异有显著性意义(P<0.01)。第五组使用普通造影剂与使用靶向造影剂相对应的内膜和斑块峰值、显影时间比较有显著著异(P<0.05)。结论携p-selectin单抗靶向微泡在体内、体外均能与血管内皮特异性结合,有利于靶向微泡超声造影显像,提高对粥样硬化动脉内膜及斑块超声诊断的敏感性。
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