【摘 要】
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[目的]T-2毒素是由镰刀菌产生的一种毒性很强的单端孢霉烯族毒素,对人类和动物的生命健康造成很大的损伤与危害。本实验旨在从DNA甲基化和炎症角度诠释T-2所致肝细胞损伤的分
【机 构】
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国家兽药残留基准实验室(华中农业大学),农业部兽药残留检测重点实验室; 农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉); 华中农业大学动物医学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31572575和31602114)
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[目的]T-2毒素是由镰刀菌产生的一种毒性很强的单端孢霉烯族毒素,对人类和动物的生命健康造成很大的损伤与危害。本实验旨在从DNA甲基化和炎症角度诠释T-2所致肝细胞损伤的分子机制,以期为T-2毒素新型解毒剂的研制和开发提供一定的理论依据。[方法]本研究一方面以大鼠为实验动物模型,开展T-2毒素(2 mg/kg bw) 7天毒性试验,检测T-2毒素对大鼠肝中炎性细胞因子的表达以及炎性因子启动子区甲基化的变化,探索T-2毒素下DNA甲基化和炎性细胞因子的关系;另一方面以BRL细胞为模型,应用qPCR、Western blot、亚硫酸氢盐测序(BSP)和流式细胞术在分子水平检测细胞损伤。此外,用DNA甲基化抑制剂和T-2毒素的联合孵育细胞,来更进一步证明DNA甲基化参与T-2毒素所致的炎性细胞因子的表达。[结果]实验结果表明,T-2毒素导致大鼠肝炎性增生,且炎性细胞因子(IL-6、IL-1β、IL-11、IL-1α和TNF-α)大量表达;同时T-2毒素显著提高全基因组5-甲基胞嘧啶(5-mc)水平和肝损伤部位的DNA甲基转移酶(DNMT1,DNMT3a)水平。值得注意的是,在T-2毒素作用下,DNA去甲基化直接增加了炎性细胞因子IL-11、IL-6、IL-α和TNF-α的表达。DNA甲基化抑制剂联合T-2毒素直接或间接诱导炎症细胞因子的产生,加重细胞凋亡。[结论]综上所述,本研究发现DNA甲基化介导了T-2毒素诱导的肝损伤中炎症细胞因子的表达,表明DNA甲基化是T-2毒素诱导肝毒性的一个潜在机制,这为后期进一步诠释T-2毒素所致的细胞损伤机制以及拮抗T-2毒素炎性的新型药物的研发奠定科学基础。
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