论文部分内容阅读
从食鹿角菜假交替单胞菌ASY5克隆得到κ-卡拉胶酶基因(786 bp),预测编码250个氨基酸.将该基因在Escherichia coli BL21 (DE3)中表达,对重组酶的SDS-PAGE分析表明该酶的分子量为30 kDa,以κ-卡拉胶为底物时酶的比活力达463.1 U/mg,Km、Vmax和Kcat分别为2.04 mmol/L、100.77 μmol/(mg·min)和2283.64 s-1.酶学性质研究表明,酶的最适反应温度和pH分别为45℃和pH 6.5；在40℃下保温30 min,残余酶活为80.0％以上,在pH 6.5-7.5的缓冲液中处理60 min,仍能保持50.0％以上的酶活力,浓度为1 mmol/L的Cd2+、Ag+对酶活有促进作用,1 mmol/L的Sn2+、Ba2+、Ca2+、Al3+、Mg2+、Sr2+、Mn2+、Zn2+、Fe2+、Fe3+对酶活有抑制作用,浓度为10 mmol/L的Cd2+、Ag+、Sn2+、Ba2+、Ca2+、Al3+、Mg2+、Sr+、Mn2+、Zn2+、Fe2+、Fe3+对酶活有抑制,去垢剂和抑制剂EDTA和CTAB, SDS、Urea、 Tween-20、Tween-80和Triton X-100对酶活性都有显著抑制作用.