【摘 要】
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目的：选择大鼠表皮干细胞,以仿生几丁质膜作为基质网架,构建组织工程仿生膜覆盖物。方法：采用DispaseII、胰蛋白酶和EDTA冷消化法,用IV胶原贴壁法分离大鼠表皮干细胞。用Alamar Blue测定表皮干细胞生长曲线,用流式细胞仪检测CD29、CD71 、CD49d、和CD34,用免疫组化测定 CK15、CK19、P63的表达。并把密度为2×106个/mL的表皮干细胞,种植在几丁质膜材料表面,
【机 构】
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暨南大学附属广州市红十字会医院 创伤外科研究所 广东省广州市510220
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目的：选择大鼠表皮干细胞,以仿生几丁质膜作为基质网架,构建组织工程仿生膜覆盖物。方法：采用DispaseII、胰蛋白酶和EDTA冷消化法,用IV胶原贴壁法分离大鼠表皮干细胞。用Alamar Blue测定表皮干细胞生长曲线,用流式细胞仪检测CD29、CD71 、CD49d、和CD34,用免疫组化测定 CK15、CK19、P63的表达。并把密度为2×106个/mL的表皮干细胞,种植在几丁质膜材料表面,扫描电镜观察材料的生长情况。结果：细胞生长良好,细胞倍增时间48h,流式细胞仪(FCM)测定 CD29 +,CD49d +,CD71-,CD34-,组织学测定CK19 +,CK15阳性；2-4W在几丁质膜上形成肉眼可见棋盘样细胞集落,扫描电镜下见大量的干细胞集落增殖,分泌外基质,生长良好。结论：表皮干细胞种在仿生几丁质膜上生长良好,2－4周可形成棋盘状干细胞集落,可用于皮肤组织工程表皮覆盖物。为以自体或异体的表皮干细胞作为种子细胞,在载体材料上形成仿生膜,覆盖创面,促进创面愈合,具有广阔的应用前景。
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