RSV感染诱导的RANTES、FKN、IP-10表达及PPARγ激动剂抑制作用的体外研究

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sme_william
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目的:研究A549细胞RSV感染后趋化因子RANTES、FKN、IP-10 mRNA和蛋白水平的变化及PPARγ激动剂15d-PGJ2和罗格列酮及其拮抗剂(GW9662)的干预作用.方法:建立RSV感染A549细胞模型,将传代培养的细胞随机分成5组:A组(15d-PGJ2+RSV组),B组(罗格列酮+RSV组)、C组(DMSO+RSV组)、D组(GW9662+罗格列酮+RSV组)、E组(细胞对照组).A、B和C组先分别以10-20μmol/L的15d-PGJ2、 10-30μmol/L的罗格列酮和DMSO预处理0.5h,再加100 TCID50 RSV吸附2h后加培养液37℃、5%C02培养;D组先以10μmol/L的GW9662预处理0.5h,再加10μmol/L的罗格列酮作用2h后以100 TCID50 RSV吸附2h,然后加培养液培养;E组未予处理正常培养.各组分别在培养12h、24h、48h收获细胞及上清液待测,应用ELISA检测RANTES、FKN、IP-10蛋白水平,实时荧光定量RT-PCR检测RANTES、FKN、IP-10 mRNA表达.结果:与E组相比,C组RANTES, FKN, IP-10 mRNA和蛋白的表达在12h, 24h和48h均明显升高,其中RANTES, FKN, IP-10 mRNA的表达量在24h达高峰,48h有所下降,与12h的表达量比较差异无统计意义;而RANTES, FKN, IP-10蛋白的表达量均在48h达高峰,与12h, 24h比较差异有统计学意义。在同一时间点上,不同浓度的15d-PGJ2和罗格列酮随着剂量的增加,三种趋化因子mRNA和蛋白的表达量均呈剂量依赖性下降,但仍高于E组,其中20Nmol/L15d-PGJ2和30Nmol/L罗格列酮干预后三种趋化因子mRNA和蛋白的表达量最低。C组与D组相比,三种趋化因子mRNA和蛋白表达量的差异无统计学意义。结论:RSV感染可导致RANTES, FKN和IP-10mRNA及蛋白表达升高,PPARγ激动剂能以剂量依赖性方式抑制上述趋化因子mRNA和蛋白的表达。
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