人脂肪组织细胞外基质支架的制备与检测

来源 :2015中华医学会整形外科学分会第十四次全国学术交流会暨第五届中国(福州)ISAPS美容整形外科高级研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangdalu
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  目的:制备人脂肪组织细胞外基质支架并初步检测其脱细胞效果、成分、机械性能、细胞相容性等指标,为脂肪组织工程寻找理想的支架材料。方法:取正常脂肪组织25g经反复冻融、酶消化、有机溶剂提取脂质、冷冻干燥等处理制备成人脂肪组织细胞外基质支架。大体观察支架性状,行HE、Masson染色、DAPI荧光染色观察支架脱细胞效果;免疫组织化检测细胞外基质(Ⅳ型胶原、层粘连蛋白)保留情况;扫描电镜观察支架显微结构;万能力学试验机测试支架机械性能。利用酶消化法提取人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells, hADSCs),取第3代细胞与人脂肪组织细胞外基质支架复合培养,CCK8检测细胞增殖活性;扫描电镜观察细胞黏附情况。结果:脂肪组织细胞外基质支架呈海绵网状结构;脱细胞彻底,细胞外基质成分Ⅳ型胶原及层粘连蛋白保留完好,机械性能较正常有所下降。支架与hADSCs复合培养,细胞在支架上增殖、黏附良好。结论:联合应用物理、化学、酶处理、真空冷冻干燥等方法所制备的人脂肪组织细胞外基质支架保留了较完整的细胞外基质成分,细胞相容性好,是脂肪组织工程理想的支架材料。
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