【摘 要】
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目的探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与转化生长因子β1（TGF-β1）信号的关系。方法用胰酶消化法分离、培养新生 SD 大鼠的 CFs,采用四氮唑盐（MTT）比色法(A490值)
【机 构】
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中国人民解放军第四军医大学唐都医院心内科;
【基金项目】
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陕西省科学技术研究发展计划项目 2005K13-G1-3
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目的探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与转化生长因子β1（TGF-β1）信号的关系。方法用胰酶消化法分离、培养新生 SD 大鼠的 CFs,采用四氮唑盐（MTT）比色法(A490值)测定细胞数目,[3H]脱氧胸腺嘧啶核苷（[3H]-TdR）掺入法测定 CFs 的 DNA 合成速率,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测TGF-β1的 mRNA 表达水平。结果糜酶以剂量依赖方式增加 CFs 数目与 DNA 合成速率。15、30和60 ng/mL 糜酶组的 A490值分别为0.263±0.033、0.348±0.031和0.387±0.026,均明显高于对照组的 A490值（0.201±0.019,P<0.01）。15、30和60 ng/mL 糜酶组的[3H]-TdR 掺入率均显著高于对照组（P<0.01）;糜酶抑制剂预处理抑制糜酶引起的 CFs 数量与[3H]-TdR 掺入率的增加。糜酶以剂量依赖方式增加 CFs 的 TGF-β1 mRNA 表达水平。其中15和30 ng/mL 糜酶组的 TGF-β1 mRNA 表达水平分别为0.650±0.040和0.843±0.021,均显著高于对照组（0.417±0.031,P<0.01）。缬沙坦和 PD123319预处理都不影响糜酶引起的 CFs 数目、[3H]-TdR 掺入率和 TGF-β1mRNA 水平的变化。TGF-β1中和抗体预处理却能抑制糜酶引起的 CFs A490值和[3H]-TdR 掺入率的变化（P<0.01）。结论糜酶具有促进大鼠 CFs 增殖的作用,其机制可能与 TGF-β1基因表达上调有关,该作用与血管紧张素Ⅱ途径无关。
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