【摘 要】
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氢氘交换质谱法是一种研究蛋白质高级结构的新型质谱技术,在蛋白质组结构及动态变化研究蛋白表位及活性位点的鉴定方面具有广泛的应用,是小分子药物和生物制药研究中的重要工
【机 构】
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沃特世科技(上海)有限公司,上海201206
【出 处】
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2015年生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会
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氢氘交换质谱法是一种研究蛋白质高级结构的新型质谱技术,在蛋白质组结构及动态变化研究蛋白表位及活性位点的鉴定方面具有广泛的应用,是小分子药物和生物制药研究中的重要工具.氢氘交换质谱的原理是利用蛋白骨架上的氨基氢与重水中的氘原子在溶液中可以进行交换,处于蛋白表面或者形成氢键的氨基氢发生氢氘交换速度较快,而位于蛋白内部的氨基氢交换速度较慢.通过测量蛋白骨架上氨基氢的HDX速率就可以获得蛋白空间构象的信息。由于氢原子和氖原子的质量数的差异，质谱可以用于鉴定两者的区别，最早在1991年就有研究者利用氢氖交换质谱研究了蛋白构象。尽管目前该技术并没有NMR和X-Ray等传统方法的分辨率高，但是HDX-MS的方法对蛋白纯度要求低，不需结晶，只需要少量样品等优势，此外，该方法能够提供生理状态下的构象，更能反映蛋白的真实状态。[4,s]HDX-MS在生物制药领域的应用涵盖了从药物发现到功能验证，包括研究蛋白构象，修饰引起的动态变化，折叠，蛋白降解以及蛋白/蛋白相互作用等。
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