【摘 要】
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目的：ING4(肿瘤生长抑制因子4)和IL-24(白细胞介素24)双基因共表达腺病毒载体对MDA-MB-231乳腺癌细胞的抑癌增效作用。方法：将Ad-ING4-IL-24腺病毒感染人乳腺癌MDA-MB-231
【机 构】
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苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室,江苏苏州215123
【出 处】
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全国转基因技术开发应用与安全管理交流研讨会
论文部分内容阅读
目的：ING4(肿瘤生长抑制因子4)和IL-24(白细胞介素24)双基因共表达腺病毒载体对MDA-MB-231乳腺癌细胞的抑癌增效作用。方法：将Ad-ING4-IL-24腺病毒感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,用RT-PCR法、Western blot法检测ING4和/或IL-24基因在肿瘤细胞中的转录和表达；MTT法、Hoechst33258染色法和FCM检测ING4和/或IL-24基因的表达对乳腺癌细胞的生长抑制、周期分布和凋亡效应；RT-PCR检测凋亡相关基因的转录：ELISA法检测VEGF、Ang-1的分泌水平；在乳腺癌的裸鼠移植瘤动物模型上,检测Ad-ING-IL-24对移植瘤生长的抑制作用,并通过免疫组化法检测Bcl-2,Bax,Caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果：ING4和IL-24基因可在MDA-MB-231细胞中成功转录及表达,并对乳腺癌细胞增殖有明显抑制作用,并能引起细胞周期中G2/M期阻滞及细胞凋亡,可呈现典型细胞凋亡形态学变化,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值升高、Survivin降低有关：VEGF、Ang-1表达下降：动物实验表明Ad-ING4-IL-24能显著抑制移植瘤生长,瘤重抑瘤率达88.1％,具有抑瘤增敏协同作用(Q=1.29＞1.15)；免疫组化结果显示Ad-ING4-IL-24能明显上调与细胞凋亡相关的因子Bax和Caspase-3的表达和下调Bcl-2、Survivin和CD34的表达。结论Ad-ING4-IL-24在肿瘤基因治疗中是非常理想的抑癌增效载体。
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