复合PCR进行胸膜肺炎放线杆菌血清型分型

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxwp_xu
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根据胸膜肺炎放线杆菌的外毒素apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣA基因和荚膜多糖cp2基因设计特异性引物7对,进行三次PCR,将16株参考菌株进行血清分型.采用针对apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ基因的5对引物进行一次多重PCR,采用针对apxⅣA基因的一对引物以及cp2基因的一对引物分别进行一次PCR.通过5对引物的复合PCR能将15个血清型分成5组,其中第一组包括血清1型、5a型、5b型、9型、和11型,第二组包括血清2型、4型、6型、8型以及15型,第三组则仅有3型,第四组包括血清7型、12型、13型,最后一组包括血清10型和14型.通过apxⅣA基因的引物PCR又能将15个血清型分成四组,第一组包括血清1型、3型、12型、13型、14型和15型,第二组包括血清2型、5a型、5b型、7型、8型以及10型、第三组包括血清4型、9型、11型,第四组仅含有血清6型.cp2基因的引物将血清2型和8型区分.实验结果能使胸膜肺炎放线杆菌除5a与5b、9与11、12与13型外的所有血清型区分.本实验报道的PCR分型体系是目前基因分型中区分血清型最多的方法,可以作为胸膜肺炎放线杆菌血清型分型的一种快速而有效的鉴定方法.
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