【摘 要】
：
本研究利用肌肉注射联合活体电穿孔技术将表达肝素酶基因的裸质粒DNA疫苗导入小鼠体内，间隔1周共免疫8次，不同的免疫时间点获取各主要脏器；提取组织总RNA，以其为模板进行RT—PCR，
【机 构】
：
北京放射医学研究所药理与毒理研究室,100850
【出 处】
：
第七次全国医学分子微生物学及生物技术研讨会
论文部分内容阅读
本研究利用肌肉注射联合活体电穿孔技术将表达肝素酶基因的裸质粒DNA疫苗导入小鼠体内，间隔1周共免疫8次，不同的免疫时间点获取各主要脏器；提取组织总RNA，以其为模板进行RT—PCR，并且利用实时荧光定量PCR技术考察肝素酶在各组织的表达情况；及质粒本身的生物分布情况。对持续高表达和高分布的组织，利用琼脂糖凝胶分离游离质粒DNA与基因组DNA，考察质粒DNA疫苗是否与基因组发生整合。结果：发现小鼠在肌肉注射联合电穿孔导人人肝素酶质粒瞬时(24小时)和长期(5/8周)，表现出不同的特点。瞬时电穿孔给药，在主要脏器均能检测到质粒的表达和分布，而5周和8周后，仅能在注射部位发现微量的tuRNA表达，在其它器官均无表达；而肝素酶质粒本身在所有的组织均未检测到。本研究提示，电穿孔作为一种基因导入手段在本研究的剂量和操作下是安全、可控、高效的。
其他文献
目的：通过对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者血清抗血管内皮细胞抗体(Anti endothelial cell antibodies，AECA)血浆血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth f
目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细
目的：检测汉坦病毒感染人淋巴细胞后人正常T细胞表达分泌调节活化因子(RNATES)和干扰素调节因子-7(IFR-7)mRNA的表达情况，探讨其致病机制。 方法：用汉滩病毒感染人淋巴细胞系
猪血,是一种价格低廉但与人体健康息息相关的营养保健食品。猪血营养极为丰富。据分析,每100克猪血中含蛋白质19克,脂肪0.4克碳水化合物0.6克,矿物质0.4克。此外,还含有铁、
连日来,我国北方是罕见的白雪皑皑的暴雪天,南方是八十年一遇的罕见的冻雨天,强冷空气在中华大地上疯狂肆虐,使南来北往的铁路、公路、航空运输中断,近乎瘫痪,成千上万在外
目的:构建含有汉坦病毒M基因(编码糖蛋白G2)和部分S基因(编码核蛋白主要抗原区段)以及S基因的多个CTL表位的多种重组腺病毒表达载体,并对这些重组腺病毒的免疫学特性进行研究
目的：比较多种念珠菌菌种鉴别方法，探寻最佳的念珠菌菌种鉴别方法。 方法：采集230例健康人群口腔粘膜样本，分别用玉米TWEEN80培养观察厚膜孢子法，糖发酵生化反应法，CHROMagar-念
目的：乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是潜在的黏膜免疫保护性抗原的递送载体。以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)为载体，将鼠疫抗原LcrV基因导入乳酸乳球菌内，构建重组肠道微
目的：研究结核分枝杆菌ESAT6-MPT64融合抗原在小鼠体内诱导的免疫应答。 方法：用原核表达的重组ESAT6-MPT64融合抗原免疫BALB/C小鼠，ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度和
目的：分析丙肝抗体确证试剂检测结果。 方法：用两种国外抗HCV确证试剂(CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA，MP HCV Blot 3.0)对89份抗HCVEIA试剂(Ortho抗HCV EIA)检测为高值阴性或弱阳