【摘 要】
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鱼类是主要的致敏食物之一,痕量的过敏原即可能导致过敏患者产生严重的过敏反应.因此,有必要建立灵敏度高、特异性好的针对主要过敏原小清蛋白的检测方法.本研究以纯化的淡
【机 构】
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集美大学生物工程学院 厦门 361021
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鱼类是主要的致敏食物之一,痕量的过敏原即可能导致过敏患者产生严重的过敏反应.因此,有必要建立灵敏度高、特异性好的针对主要过敏原小清蛋白的检测方法.本研究以纯化的淡水鲢鱼小清蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合后,经筛选获得抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体.ELISA和Western blot结果表明,制备的抗小清蛋白单克隆抗体的效价高,特异性好.利用该单克隆抗体建立了对鱼类小清蛋白进行定量检测的竞争性ELISA法.该方法检测限可达0.04 mg/kg食物,定量限为0.3 mg/kg食物;组内差异系数和组间差异系数分别为4.4%和8.4%,表明建立的检测方法重复性较好.将建立的竞争性ELISA法用于检测不同鱼类肌肉中小清蛋白的含量,结果显示,白色肉中小清蛋白的含量约为红色肉的4~20倍.采用本方法以鲢鱼丸为样品研究漂洗次数对鱼肉制品中小清蛋白含量的影响,发现漂洗可有效降低小清蛋白含量.但是,即使经过10次漂洗后的鱼丸中仍然含有少量小清蛋白.本研究建立的检测方法有望用于水产品加工过程及制品中痕量鱼类过敏原小清蛋白的监测.
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