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目的:探讨siRNA沉默COCH基因对肝癌细胞株SMMC-7721,Hep3B和HepG2的生长增殖的影响,并初步探讨其作用机制.
方法:采用脂质体Lipofectamine 2000将COCH-siRNA和Negative Control-siRNA转染至人肝癌细胞株SMMC-7721,Hep3B和HepG2;分别设si-RNA、NC和空白对照组.用PCR检测细胞株中基因表达情况,CCK-8法检测并绘制细胞生长曲线,细胞集落形成实验,用Western blot检测细胞cochlin蛋白和ERK及p-ERK的表达,用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡。
结果:si组COCH基因表达量明显低于NC组和空白对照组,后两者差别无统计学意义;si组细胞生长曲线明显低于NC组和空白组;Western blot检测结果显示cochlin蛋白和p-ERK的表达量均低于NC和空白对照组;流式细胞仪检测细胞周期三组无明显差异,而凋亡显示si组凋亡区域细胞量明显高于NC组和对照组。
结论:siRNA沉默COCH基因对肝癌细胞株生长增殖有抑制作用,其机制可能是通过ERK/p-ERK通路发挥作用。