【摘 要】
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目的:人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I, cTnI)合成肽及其抗体的研制,为以国产试剂替代进口试剂奠定基础。 方法:根据cTnI氨基酸序列,结合计算机软件分析,预测cTnI分子
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所分子核医学研究室,天津,300192
【出 处】
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第四届中国核学会省市区“三核”论坛
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目的:人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I, cTnI)合成肽及其抗体的研制,为以国产试剂替代进口试剂奠定基础。
方法:根据cTnI氨基酸序列,结合计算机软件分析,预测cTnI分子的亲水性、抗原性和同源性,采用固相多肽合成法合成了cTnI分子98-110位氨基酸肽段序列(RQLHARVDKVDEE),经与载体蛋白KLH偶联作为免疫原,免疫家兔制备相应抗体。
结果:实验结果表明,采用多肽合成法合成的cTnI合成多肽(13肽),其纯度达到95％;免疫学实验证实,该肽段具有较强的免疫原性,用此多肽与KLH的连接物作为免疫原制备的抗体,其效价达到1:20万;该抗体与从心肌组织中提取的cTnI也具有较好的交叉反应性;用scatchard作图法,求得其亲和常数Ka=0.98×10<9>L/mol;与cTnT、CK-MB均无交叉反应。
结论: cTnIl合成肽及其相应抗体的研制为cTnI检测试剂的国产化奠定了基础。
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