【摘 要】
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[目的]观察无机砷混合物染毒时Keap1沉默的 HacaT细胞的活力及形态变化,探讨Keap1沉默及染砷对Nrf2通路相关基因表达的影响,探究砷致皮肤早期氧化损伤机制.[方法]培养正
【机 构】
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新疆医科大学公共卫生学院,新疆 乌鲁木齐 830011
【出 处】
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第十二届全国环境与职业医学研究生学术研讨会暨复旦大学博士生论坛公共卫生篇
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[目的]观察无机砷混合物染毒时Keap1沉默的 HacaT细胞的活力及形态变化,探讨Keap1沉默及染砷对Nrf2通路相关基因表达的影响,探究砷致皮肤早期氧化损伤机制.[方法]培养正常与Keap1沉默 HaCaT细胞,将无机砷混合受试物按照LC50的1/100、1/50、1/10分为低、中、高三个不同浓度组,即为2.90、5.80、29.00μmol/L,0μmol/L无机砷混合受试物染毒Keap1沉默 HaCaT细胞组为阴性对照组,正常细胞组为空白对照组,于四个时间点(8、24、48、72h)采用MTT法检测细胞活力,使用实时荧光定量PCR检测Nrf2通路相关基因(Nrf2、Keap1、Bach1及CBP)mRNA表达.[结果]随染砷浓度增大,细胞收缩越明显,边缘多不规则,脱壁明显.2.90μmol/L混合砷染毒促进细胞增殖,≥5.80μmol/L混合无机砷染毒抑制细胞增殖.与空白对照组比较,阴性组Nrf2通路相关基因(Bach1,CBP)表达持续升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与阴性组比较,2.90μmol/L染砷组24、48h时Nrf2基因表达无差异,Bach1、CBP基因表达均上调,差异有统计学意义(P＜0.05).5.80μmol/L染砷组24h时Nrf2基因表达无差异,Bach1、CBP基因表达均上调；48、72h时Nrf2、Bach1、CBP基因表达均下调,差异有统计学意义(P＜0.05).29.00μmol/L染砷组24、48h时Nrf2、Bach1、CBP基因表达均上调；72h时Nrf2、Bach1、CBP基因表达均下调,差异有统计学意义(P＜0.05).经两两比较,72h时随染砷浓度逐渐增加,Nrf2、Bach1、CBP基因表达逐渐下调,差异均有统计学意义(P＜0.05).[结论]抑制 Keap1 基因会引起Nrf2持续激活.Bach1和CBP协同调控Nrf2通路可能在砷致氧化应激反应中起调节作用.
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