论文部分内容阅读
目的：结合国境口岸卫生检疫工作需要，建立快速、灵敏的裂谷热病毒实时荧光RT-PCR及普通RT-PCR检测方法，对国境口岸入境疑似患者血液样本进行裂谷热病毒分子生物学筛查。方法：制备裂谷热病毒阳性样本，设计并合成相应的扩增引物及荧光标记探针，摸索最佳反应条件，研制裂谷热病毒实时荧光RT-PCR及普通RT-PCR检测方法；应用实时荧光RT-PCR方法对来自裂谷热疫区的入境疑似患者进行筛查，对阳性样本进行RT-PCR复核，并对扩增产物进行测序确认。结果：本研究的实时荧光RT-PCR方法对模拟裂谷热病毒样本的检测灵敏度达到102拷贝/反应，RT-PCR方法为103拷贝/反应。本方法快速、灵敏，并具有较高的特异性和重复性，可在三小时内准确检测出裂谷热病毒核酸。结论：鉴于我国目前尚无裂谷热病毒阳性样本，且我国口岸面临越来越大的裂谷热疫病传入风险，本方法可用于国境口岸裂谷热病毒快速检测，对防止裂谷热病毒传入我国，保障我国的国境卫生安全具有重要意义。