紫色杆菌素基因簇的分子克隆、异源表达和高效合成

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紫色杆菌素具有很重要的生物活性,可以作为潜在的抗肿瘤、抗病毒药物及生物染料。挖掘合成蓝紫色色素的微生物资源并建立其微生物高产生产工艺具有重要的研究价值。本研究自新疆冰川样品分离到一株产紫色杆菌素的耐冷细菌B2,采用PCR walking方法成功的分离到B2 菌株的vio 基因簇序列。为了减少蓝色素的合成对菌体生长的影响和解决原始菌株需要低温长时间培养的问题,构建了vio 基因工程菌,现了B2的vio基因簇在恶臭假单胞菌中的异源高效表达。工程菌株经过48小时发酵培养产量比原始菌株提高了25%。由于脱氧紫色杆菌素在蓝紫色素中的比例较小,很难分离得到足够的量来研究其性质和功能,因此目前对其详细的功能还不是很清楚。本研究根据紫色杆菌素的已知合成途径,对合成紫色杆菌素基因簇的D 基因进行敲除,构建了只合成脱氧紫色杆菌素的基因工程菌。合成的脱氧紫色杆菌素产量达到1.4g/l,为原始菌株的10倍左右。
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