【摘 要】
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本实验的目的是通过建立EPA诱导成肌细胞转分化成脂肪细胞的模型,来研究EPA诱导成肌细胞转分化成脂肪细胞的分子机理.用不同浓度的EPA对C2C12成肌细胞进行转分化诱导,筛
【机 构】
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教育部动物遗传育种与繁殖重点实验室,农业部猪遗传育种重点开放实验室,华中农业大学动物科技学院动物营养与饲料科学系,武汉430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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本实验的目的是通过建立EPA诱导成肌细胞转分化成脂肪细胞的模型,来研究EPA诱导成肌细胞转分化成脂肪细胞的分子机理.用不同浓度的EPA对C2C12成肌细胞进行转分化诱导,筛选出EPA最佳的转分化诱导浓度为400μM.使用400μM进行转分化诱导,并通过realtime PCR方法分析成肌和成脂标志基因表达模式的变化,发现EPA处理显著抑制了成肌标志基因的表达,并显著促进了成脂标志基因的表达.通过对脂肪酸核受体在转分化过程中表达模式的分析和PPARγ2启动子报告系统的验证,筛选出能上调PPARγ2表达的脂肪酸核受体PPARγ1.通过PPARγ2启动子截短、突变和删除以及CHIP实验,证实PPARγ1能通过结合PPARγ2启动子上-890 ～-878位置上的功能性PPRE来激活PPARγ2的表达.综上所述,400μM的EPA可以有效诱导成肌细胞转分化形成脂肪细胞.其分子机制是：在EPA诱导的成肌细胞转分化过程中,被EPA激活的PPARγ1能结合PPARγ2启动子上的功能性PPRE,上调PPARγ2的表达,从而诱导转分化的发生.
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