骨桥蛋白与子宫内膜癌细胞侵袭、转移的相关性研究

• 作 者: 李英华 马艳妮 张漫 朱晨阳 隋琳琳 孔英
• 机 构: 大连医科大学基础医学院
• 出 处: 第六届中国细胞生物学学会HIPPO年会暨大连医科大学2016年生命科学学术交流会
• 发表日期: 2016年8期
• 关键词: OPN 子宫内膜癌细胞 侵袭 转移

　　子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是常见的影响女性生殖的恶性疾病且发病率逐年升高,成为严重威胁我国女性生殖健康的恶性肿瘤。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种具有多种生物学功能的钙结合磷酸化糖蛋白,广泛存在于人体各组织及体液中,与肿瘤细胞生长增殖和侵袭转移密切相关,被认为是一种新的肿瘤标志物。本研究选用人子宫内膜癌细胞(HEC-1A细胞),用不同浓度(0ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、300ng/ml、400ng/ml)的OPN重组蛋白(rhOPN)处理细胞24h,通过CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell小室实验,检测rhOPN对HEC-1A细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力的影响,结果显示：在rhOPN为300ng/ml时,HEC-1A细胞的增殖、迁移能力和侵袭能力最强,且随着rhOPN浓度的增加,HEC-1A细胞MMP-2蛋白表达量逐渐上升；选用300ng/mlrhOPN与HEC-1A细胞共培养,分别在不同的时间(0h、4h、8h、12h、24h、48h),以Westen-blot和明胶酶谱实验检测,24h时rhOPN对HEC-1A细胞中MMP-2蛋白表达最高、活性最强；免疫荧光检测结果显示,rhOPN可调控HEC-1A细胞膜上相应通路分子E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达；以不同浓度rhOPN处理HEC-1A细胞24h,Western-blot检测rhOPN对HEC-1A细胞相关信号通路分子ERK和AKT的表达影响,以相关信号通路分子的特异性抑制剂U0126(MEK1/2抑制剂)、LY294002(PI3K抑制剂)分别抑制HEC-1A细胞ERK1/2和AKT的活性,Westen-blot检测rhOPN蛋白对HEC-1A细胞MMP-2、N-cadherin和Vimentin的表达上调作用受到不同程度的抑制,对E-cadherin的表达下调作用也受到抑制。本实验证实：OPN可提高HEC-1A细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力,并通过活化ERK和AKT来促进HEC-1A细胞MMP-2、N-cadherin及Vimentin蛋白的表达,抑制E-cadherin蛋白的表达。