【摘 要】
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研究背景:miRNA在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,多种miRNA在不同肿瘤恶性转化中的促癌/抑癌作用已被证实,但不同miRNA在特定肿瘤中发挥功能的机制仍需深入探索.目的:探讨RNA-221/222(MiR-221/222)对胶质瘤细胞生物学功能的影响和下游调节靶基因,观察MiR221/222在胶质瘤生物学行为中所起的作用.方法:通过荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14例胶质瘤
【机 构】
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第四军医大学基础部免疫教研室;海军总医院神经外科 第四军医大学基础部免疫教研室
【出 处】
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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会
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研究背景:miRNA在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,多种miRNA在不同肿瘤恶性转化中的促癌/抑癌作用已被证实,但不同miRNA在特定肿瘤中发挥功能的机制仍需深入探索.目的:探讨RNA-221/222(MiR-221/222)对胶质瘤细胞生物学功能的影响和下游调节靶基因,观察MiR221/222在胶质瘤生物学行为中所起的作用.方法:通过荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14例胶质瘤样本和5种胶质瘤细胞系中MiR221/222和基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP2)的表达;利用人工合成MiR-221/222模拟物和抑制物瞬时转染脑胶质瘤细胞,qRT-PCR检测转染后细胞中MiR-221/222的表达水平;采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖情况;流式细胞术(FCM)检测细胞周期与凋亡;Transwell检测细胞侵袭与转移能力;条件培养液培养内皮细胞检测血管生成能力;结合生物学信息预测、双荧光素酶报告基因、qRT-PCR和WesternBlot验证下游靶基因TIMP2的表达水平;体外同时转染miR-221/222和TIMP2过表达质粒检测细胞侵袭与转移和血管生成能力.
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