【摘 要】
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利用激光共聚焦拉曼光谱分析了泥鳅抗菌蛋白MAPP的二级结构.首先,用凝胶过滤、离子交换层析、制备电泳等方法从泥鳅体内纯化出抗菌蛋白MAPP,经氨基酸组成分析、质谱指纹图分
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利用激光共聚焦拉曼光谱分析了泥鳅抗菌蛋白MAPP的二级结构.首先,用凝胶过滤、离子交换层析、制备电泳等方法从泥鳅体内纯化出抗菌蛋白MAPP,经氨基酸组成分析、质谱指纹图分析、N端序列标签检索,证明MAPP为一个新的蛋白质.其次,用激光共聚焦拉光谱对MAPP的二级结构进行了分析.将MAPP分别溶于H<,2>O和D<,2>O中,4℃静置24h,高速离心后取上清液冻干粉分别用激光共聚焦拉曼光谱仪(RM1000 Confocal Spectroscopy System,ERNISHOW Company,U.K.)分析二级结构.以1240cm<-1>处的酰胺Ⅲ谱带强度和1660cm<-1>处的酰胺Ⅰ谱带强度分别表征β折叠和无序结构,以1632cm<-1>处的酰胺Ⅰ谱带强度表征α螺旋,以1448cm<-1>处的CH<,2>弯曲振动为基准,同时使用聚-L-赖氨酸为参照物.经计算得出MAPP二级结构的中各个亚结构单元的含量分别为:α螺旋约51﹪;β折叠约19.8﹪;无序结构约29.2﹪.MAPP干粉在室温下静置24h后其二级结构组成基本不变.
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