【摘 要】
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疏水蛋白可在菌丝细胞表面形成疏水层,促进气生菌丝生长和原基形成.本研究分析了金针菇疏水蛋白Fv-Hyd1 基因在不同生长发育时期的表达水平,发现它在菌丝纽结时显著上调表达.为了研究该基因的功能,我们构建了疏水蛋白Fv-Hyd1 基因的过表达和RNA 干扰载体,采用脂质体介导的方法转化双核菌株H1123,经过潮霉素抗性筛选和PCR 检测,得到4 个转化子,其中过表达2 个、RNA 干扰2 个.实时荧
【机 构】
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福建农林大学菌物研究中心,福建省福州市 350002
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疏水蛋白可在菌丝细胞表面形成疏水层,促进气生菌丝生长和原基形成.本研究分析了金针菇疏水蛋白Fv-Hyd1 基因在不同生长发育时期的表达水平,发现它在菌丝纽结时显著上调表达.为了研究该基因的功能,我们构建了疏水蛋白Fv-Hyd1 基因的过表达和RNA 干扰载体,采用脂质体介导的方法转化双核菌株H1123,经过潮霉素抗性筛选和PCR 检测,得到4 个转化子,其中过表达2 个、RNA 干扰2 个.实时荧光定量PCR 结果表明,与受体菌株(H1123)相比,2 个过表达转化菌株Fv-Hyd1 基因的表达量分别上调了约44.99 倍和53.68 倍,而2 个RNA 干扰转化菌株该基因表达量仅为受体菌株的0.34 倍和0.11 倍.菌落形成特征观察结果表明,过表达菌株气生菌丝浓密、干扰菌株则相反,表现为贴生型,气生菌丝少.出菇试验结果表明,过表达菌株原基形成提前、菇蕾整齐,干扰菌株则相反.细胞壁敏感性检测结果表明,Fv-Hyd1 高表达可提高菌丝细胞壁的敏感性.
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