论文部分内容阅读
目的 研究由早期母爱剥夺应激和成年慢性不可预知性应激诱发的抑郁大鼠伏隔核和纹状体内DRDI、DRD2、m1R-9、miR-504基因的表达变化;探索两种心理应激方式之间是否存在交互作用及m1R-9、m1R-504是否分别参与DRD2和DRDI基因表达的调控.方法 采用母爱剥夺应激和慢性不可预知性应激建立应激性抑郁大鼠模型;采用糖水偏爱实验、强迫游泳实验和旷场实验评定大鼠抑郁样行为;采用实时定量荧光PCR(Real-time PCR)检测mRNA和miRNA的表达水平;采用免疫印迹法(Western Blot)检测蛋白质表达水平.结果 1.行为学结果:母爱剥夺应激对旷场实验中的中央爬行路程比率和大便颗粒的影响有主效应(p<0.05);慢性不可预知性应激对强迫游泳实验中静止漂浮时间、旷场实验中的爬行总路程和直立次数的影响有主效应(p<0.05);两种应激方式对糖水偏爱率的影响具有交互作用(p<0.05).2.miRNA表达水平检测.结果:母爱剥夺应激对大鼠纹状体miR-504、m1R-9的表达水平的影响有主效应(p<0.05);慢性不可预知性应激对大鼠伏隔核miR-9的表达水平的影响有主效应(p<0.05);两种应激方式对大鼠伏隔核m1R-504和纹状体miR-504、m1R-9表达水平的影响具有交互作用(P<0.05).3.mRNA表达水平检测 结果:母爱剥夺应激对大鼠伏隔核DRDI、DRD2 mRNA表达水平的影响具有主效应(p<0.05);两种应激方式对大鼠纹状体DRDI、DRD2 mRNA表达水平的影响具有交互作用(p<0.05);相关分析显示伏隔核miR-504/DRDI mRNA和纹状体miR-9/DRD2 mRNA相关显著(p<0.05).5.蛋白表达水平检测结果:母爱剥夺应激对大鼠伏隔核DRDI、DRD2和纹状体DRD2蛋白表达水平的影响具有主效应(p<0.05);慢性不可预知性应激对大鼠纹状体DRDI蛋白表达水平的影响有主效应(p<0.05);两种应激方式对大鼠伏隔核DRDI蛋白表达水平的影响具有交互作用(p<0.05).结论 1.慢性不可预知性应激能诱发大鼠产生抑郁样行为,而母爱剥夺应激不直接诱发大鼠抑郁样行为的出现,而是作为抑郁易感因子;2.慢性不可预知性应激并不明显影响m1R-9/DRD2和miR-504/DRDI伏隔核和纹状体内的表达;3.母爱剥夺应激能引起m1R-9/DRD2和miR-504/DRDI在伏隔核和纹状体内差异性的改变;增加大鼠对慢性不可预知性应激的神经生物学反应,并且在这一过程中miR-9和miR-504可能分别参与纹状体DRD2和伏隔核DRDI基因表达的调控,提示可能是母爱剥夺应激作为抑郁易感因子的神经生物学基础.