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目的 了解Wnt/β-catenin信号在正常真皮成纤维细胞(NFb)向肌成纤维细胞(MFb)表型转化中的作用,探讨其可能的作用机制.方法 手术获取3例患者的正常皮肤组织,体外分离培养成纤维细胞(NFb),实验用第5代细胞.实验分为两部分.1.将NFb采用随机数字法随机分为4组,分别是对照组,TGF-β1组,Wnt3a组和TGF-β1+Wnt3a组；采用实时荧光定量PCR和免疫印迹的方法分别检测各组细胞中β-catenin和α-SMA的mRNA和蛋白表达水平.2.另将NFb用随机数字法随机分为4组,分别为对照组,TGF-β1组,SB415286组和TGF-β 1+SB415286组,采用实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫荧光细胞化学法分别检测各组细胞中α-SMA的mRNA和蛋白表达水平及α-SMA阳性表达的细胞情况.结果 1.各组NFb中β-catenin的mRNA表达水平分别为1.09±0.21,1.11±0.19,1.06±0.13,0.97±0.22,无统计学差异(F=0.302,P=0.823)；而与对照组(0.34±0.11)相比,TGF-β1组(0.73±0.12,t=3.028,P＜ 0.05)和Wnt3a组(0.82±0.17,t=3.727,P＜ 0.01)中β-catenin的蛋白表达水平上调,而二者共同作用时(1.23±0.21)也显著高于对照组(t=6.911,P＜0.01),并高于二者各自单独作用时β-catenin的蛋白表达水平(t=3.883,P＜ 0.01 vs TGF-β 1,t=3.184, P＜ 0.01 vs Wnt3a)； TGF-β1组中α-SMA的mRNA和蛋白表达水平分别为1.53±0.22和1.43±0.20,较对照组(0.65±0.12和0.83±0.17)显著上调(t=6.759,P＜ 0.01；t=4.582,P＜0.01),Wnt3a作用后其表达水平(0.32±0.17和0.53±0.12)显著下调(t=2.535,P＜ 0.05；t =2.291,P＜ 0.05),而Wnt3a与TGF-β1共同作用组(0.94±0.10和0.89±0.14)则显著低于TGF-β 1单独作用组(t=4.532,P＜ 0.01；t=4.123,P＜ 0.01).2.与对照组相比(0.66±0.15与0.79±0.17),SB415286单独作用后α-SMA的mRNA和蛋白表达水平(0.31±0.13与0.42±0.11)被显著下调(t=2.511,P＜0.05； t=2.364,P＜ 0.05),而SB415286+TGF-β1组(1.12±0.14与0.92±0.22)则显著低于TGF-β1组(1.62±0.24,t=3.587,P＜0.01与1.32±0.24,t=2.556,P＜ 0.05)；免疫荧光结果显示,对照组α-SMA阳性细胞数很少,荧光强度为0.019±0.004,TGF-β1组阳性细胞数显著增加,其荧光强度(0.093±0.010)也显著高于对照组(t=11.198,P＜0.01),而SB415286+TGF-β1组(0.054±0.011)较TGF-β1组的阳性细胞数和荧光强度都显著下调(t=5.902,P＜0.01).结论 Wnt3a激活Wnt信号通路后可以显著抑制TGF-β1所诱导的正常真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞的表型转化,抑制基础水平下和TGF-β1刺激后成纤维细胞中α-SMA的表达.使用SB SB415286活化β-catenin后也得到了类似的结果,提示Wnt/β-catenin信号可能参与成纤维细胞细胞表型转化,并且对TGF-β1所介导的促转化作用起负性调控作用.