金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysGH15催化活性域蛋白质结晶条件筛选

来源 :第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jyjlxy
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金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌,能引起多种感染性疾病.前期研究表明,噬菌体裂解酶LysGH15在对金黄色葡萄球菌引起的疾病治疗方面表现出巨大潜力.为了揭示其高效裂解活性的作用机制,本研究对LysGH15进行了蛋白质结晶条件的筛选.未能筛选到LysGH15全长蛋白结晶的条件,通过小角散射分析确定了LysGH15在溶液状态下的表面构象,表明其具有很大的柔性,解释了为何无法获得其晶体.进一步对LysGH15的两个催化活性域CHAP和amidase-2片段分别进行了表达和纯化,通过晶体条件筛选,成功获得了这两个片段的蛋白质晶体,并通过优化使晶体质量得到了进一步的提高,达到了下一步x-衍射的要求.通过本研究,为后续LysGH15的CHAP和amidase-2片段三维结构的解析奠定了基础.
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