【摘 要】
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背景：近年来,关于反复性轻型颅脑创伤已越来越引起研究人员的关注,特别是对于运动员和军人等一些反复轻型脑外伤发生的高比例人群.目的：通过建立反复性轻型成年大鼠颅脑外伤模型,并给予实验大鼠进食一段时间(伤前4周至伤后2周)富含ω3-多不饱和脂肪酸的饲料,研究其对于反复性轻型颅脑创伤的神经保护潜能.最终建立一种稳定可靠的与战创伤及运动性颅脑创伤相关的实验性脑损伤模型并验证ω3-脂肪酸在反复性轻型颅脑创伤
【机 构】
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解放军第三零六医院,神经外科,北京,100101 美国加州大学戴维斯分校,神经创伤实验室,戴维斯,
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背景：近年来,关于反复性轻型颅脑创伤已越来越引起研究人员的关注,特别是对于运动员和军人等一些反复轻型脑外伤发生的高比例人群.
目的：通过建立反复性轻型成年大鼠颅脑外伤模型,并给予实验大鼠进食一段时间(伤前4周至伤后2周)富含ω3-多不饱和脂肪酸的饲料,研究其对于反复性轻型颅脑创伤的神经保护潜能.最终建立一种稳定可靠的与战创伤及运动性颅脑创伤相关的实验性脑损伤模型并验证ω3-脂肪酸在反复性轻型颅脑创伤中的预防及治疗作用.
方法：将62只实验大鼠(体重约150克,出生时长：6周)随机根据饲养食物不同分为两组,每组各31只,其中一种食物中富含ω3-鱼脂酸,而另一组食物以普通实验饲料为对照.所有大鼠与脑损伤前4周开始进食不同食物,并持续进食至伤后2周,直至行为学实验完成.反复轻型颅脑创伤模型由侧方液压打击模型诱导形成,本次实验打击强度约为1.25倍大气压力,打击次数及创伤时间间隔为双侧双次,间隔24小时.实验期间记录每天不同组别实验动物的体重变化.颅脑创伤后10-14天连续5天行Morris水迷宫行为学测试,分别记录每只实验大鼠游向平台时间及游行速度.评估空间认知及记忆功能.行为学测试最后一天(脑创伤后16天)提取脑组织标本,行甲酚紫(CV)染色评估不同组别海马组织CA2-3区神经细胞存活状态,并进行统计学分析.
结果：两组颅脑外伤打击强度、伤后意识及反射恢复时间、损伤前后体温及脑温变化无显著性差别.伤前各组大鼠体重增长比率无差别,但伤后体重记录显示,进食富含ω3-鱼脂酸饲料组大鼠可明显减轻体重减少程度(311±25g vs321±22g),恢复至脑外伤前基础体重时间较对照饮食治疗组缩短.两组不同饮食组于脑损伤后10-14天行水迷宫行为学评估,其中各组中实验对象的游动速度及视力测试均无明显差异.进食富含ω3-鱼脂酸饲料的实验大鼠脑外伤后较进食普通饲料的实验大鼠在认知功能方面有明显改善.比较行为学测试最后一天各组别游向平台时间,ω3-鱼脂酸饮食组平均用时显著缩短(p=0.030,p<0.05).空间探索测试结果显示,二组实验大鼠均表现出目标区域相对集中性,进食富含ω3-鱼脂酸组大鼠与目标区域游动时间相对较长(22.8±3.6秒vs19.7±2.9秒).组织学检查结果：脑组织大体形态学比较(4×)：进食普通实验饲料组大鼠较进食富含ω3-鱼脂酸组大鼠相比,其脑组织海马颗粒层厚度及细胞密度减少.光镜下甲酚紫(CV)染色结果同时显示(100×),不同饮食组双侧海马CA2/3区域平均神经细胞数量比较结果上无显著性差异(左侧：p=0.149p＞0.05;右侧：p=0.253p＞0.05),然而,进食富含ω3-鱼脂酸组显示出可减少神经细胞死亡的趋势.
结论：脑外伤前至伤后一段时间进食ω3-脂肪酸,可满足机体颅脑外伤后的高代谢及能量需求状态,明显减轻反复性轻型颅脑创伤后体重下降,促进神经功能恢复,改善伤后恢复.反复性轻型颅脑损伤组可产生明显的认知功能障碍,进食富含ω3-鱼脂酸饲料可明显改善脑外伤后空间认知及记忆功能,并显示出更明显的目标区域的偏好性.虽然二组不同饮食组在平均神经细胞数目皮较无显著性差异,但与进食普通实验饲料组大鼠相比,进食富含ω3-鱼脂酸饲料的大鼠显示出增加脑外伤后长期神经细胞存活数量的神经保护潜能.
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