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本文在反相条件下进行,两对映体N-2,4-DNP-pro(DNP-pro)和N-2,4-DNP-ser(DNP-ser)在牛血清蛋白手性柱上进行了手性拆分,并对有机添加剂的比例、种类及流动相的pn的影响等因素进行了考察,同时在所有条件下进行了洗脱顺序的单样验证。结果表明,不同pH及乙腈浓度均会导致其反转,且手性识别盲点随乙腈浓度变化而变化。