基于适体技术体外检测血管内皮生长因子165

来源 :第十二届泉州市科协年会暨福建省科协第十四届学术年会卫星会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:an123
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  目的 探索适体替代抗体进行蛋白检测的可行性验证.方法 抗体和适体同时通过点杂交和Eastern blotting方法体外检测非还原和还原的VEGF165,比较灵敏性和特异性;同时利用基于适体的局部保护原理(Aptamer-Based Regionally Protected PCR,ARP-PCR)对VEGF165蛋白进行检测.结果 点杂交的结果显示,抗体和适体的检测底限均为1.75μg且特异性良好;Eastern blotting 的结果显示,抗体和适体的检测底限均为14μg且特异性良好;ARP-PCR结果显示蛋白存在时酶切0.5h、1.0h、1.5h时有因保护作用而扩增的条带.结论 点杂交和Eastern blotting的结果显示适体具有与抗体相当的灵敏性和特异性,可替代抗体进行蛋白检测;ARP-PCR检测结果显示蛋白有一定的保护作用,方法可行.
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