短尾蝮蛇毒解离素的分离纯化及活性测定

• 作 者: 许云禄;陈燕;孙沛;刘广芬;
• 机 构: 福建医科大学蛇毒研究所,福州,350004
• 出 处: 福建省药学会2006年学术年会
• 发表日期: 2006年期

目的：
从江浙产短尾蝮蛇蛇毒中分离纯化解离素,并测定其部分理化性质及活性.
方法：
应用Superdex 75 prep grade分子筛色谱分离粗毒;用Sephadex G-50凝胶过滤、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换色谱、Lichrospher C18反相层析纯化解离素; SDS-PAGE(Tris-Tricine系统)鉴定纯度;质谱法测定分子量;磺胺邻二甲氧嘧啶法(SRB)测定解离素对人胃癌细胞(SGC-7901)及人脐静脉内皮细胞(ECV304)的抑制生长作用;观察GbvⅣ4对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用.
结果：
短尾蝮蛇粗毒经分子筛色谱得到6个蛋白峰(Ⅰ～Ⅵ),其中Ⅳ具有解离素活性;再分别经凝胶色谱、离子交换色谱、反相层析纯化得GbvⅣ4;SDS-PAGE显示为均一蛋白,质谱法测定分子量7.44kDa.GbvⅣ对SGC-7901细胞具有抑制生长作用且呈剂量依赖关系;GbvⅣ4对ECV304也有抑制生长作用,其作用24h的IC50为28.90μg/ml;GbvⅣ4组(3.098、11.79g)处理后可见鸡胚CAM血管形态基本正常,呈树状分布,但分布稀疏,与NS组相比VA/CAM显著减少.
结论：
GbvⅣ4在体外具有抑制肿瘤细胞生长、血管内皮细胞的粘附和生长、抑制鸡胚尿囊膜血管生成等作用.