【摘 要】
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水稻恶苗病是一种重要的水稻病害,藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi)是其主要的病原菌.为了揭示水稻恶苗病致病的分子机理,进而指导生产上对水稻恶苗病的防治,有必要对水稻恶苗病的致病相关基因进行研究.本研究以藤仓镰刀菌F.fujikuroi EM-1-10为出发菌株,利用携带双元载体pCATPH-I的农杆菌介导转化分生孢子的方法,构建了一个藤仓镰刀菌突变体库.通过室内致病力鉴定,从突变体
【机 构】
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中国水稻研究所,杭州 310006
【出 处】
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中国植物保护学会2014年学术年会
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水稻恶苗病是一种重要的水稻病害,藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi)是其主要的病原菌.为了揭示水稻恶苗病致病的分子机理,进而指导生产上对水稻恶苗病的防治,有必要对水稻恶苗病的致病相关基因进行研究.本研究以藤仓镰刀菌F.fujikuroi EM-1-10为出发菌株,利用携带双元载体pCATPH-I的农杆菌介导转化分生孢子的方法,构建了一个藤仓镰刀菌突变体库.通过室内致病力鉴定,从突变体库中筛选得到一个致病性缺陷突变体FM-01.利用热不对称交错PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)技术获取了T-DNA插入位点序列.BLAST分析表明,突变体FM-OI的外源T-DNA插入了藤仓镰刀菌一个未知蛋白( CCT62140.1)的编码基因,该基因全长2567bp,中间有一个内含子,在本研究中,该基因被命名为FFPRI.FFPRI基因编码一个838个氨基酸的多肽链,经BLAST比对分析,该多肽链和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)的RING finger protein B的氨基酸序列的相似性达到了98%.为了研究该基因的功能,本研究构建了相关载体,利用同源重组敲除的方法获得了基因缺失菌株AFFPRI,并对其生物学性状和致病能力进行研究.研究表明,和野生菌株相比,在平板上菌落生长速度大致相当,气生菌丝稍微稀疏,产孢量略有下降,畸形孢子比例明显升高,室内接种对水稻的致病率由野生菌株的93.4%下降到29.1%,致病能力大幅下降.构建FFPRI的互补载体,转化菌株AFFPRI,获得基因恢复转化子.这些基因恢复转化子的生物学性状与野生菌株有很高的一致性,对水稻的致病率达到86.5% -91.2%,致病能力显著恢复.上述研究表明,FF-PRI在水稻恶苗病菌的致病过程中起到重要作用.
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