罗非鱼胶原蛋白的免疫特性刺激性及植入性评估

来源 :2014年中国药学大会暨第十四届中国药师周 | 被引量 : 0次 | 上传用户:objzobjz3
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  目的:确定罗非鱼胶原蛋白样品在动物体内的适应性及相关特性,为探究罗非鱼胶原蛋白在生物工程中的应用提供依据.方法:采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)对分离、提取的罗非鱼胶原蛋白进行鉴定.用罗非鱼胶原蛋白免疫小鼠,采用酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immune sorbent assay,ELISA)每次免疫后的第7天检测小鼠产生的总胶原蛋白抗体,并在首次免疫后的第21天检测小鼠血浆中内免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)和免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)的含量.对新西兰大白兔进行皮内注射,对注射后第24h、48h和72h的症状进行观察,并检测血液中IL-4及IL-6的含量.将罗非鱼胶原蛋白皮下植入进新西兰大白兔体内,并在第1周、第4周和第8周分别处死2只,观察植入部位的组织生长情况,并提取组织液检测其中的IL-4及IL-6含量.结果:罗非鱼胶原蛋白的分子量约为300KDa,三次免疫后罗非鱼胶原蛋白抗体强度范围为160.50-164.25μg/L.新西兰大白兔皮肤未出现明显红斑和肿块,罗非鱼胶原蛋白在皮下植入后对新西兰大白兔未出现明显影响,并吸收良好.结论:罗非鱼胶原蛋白符合I型胶原蛋白的特征,罗非鱼胶原蛋白样品对小鼠呈现较弱的抗原性.新西兰大白兔体内IL-4、IL-6的含量随着时间增长而降低,且在植入试验中,罗非鱼胶原蛋白产生不高于市售胶原蛋白的炎症反应.结论:罗非鱼胶原蛋白可以在实验动物体内长期存在,而不产生强烈的排异现象.可以对罗非鱼I型胶原蛋白进行进一步的研究,以期更广泛的应用.
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