香港牡蛎ECSIT基因的克隆与表达分析

来源 :2013年中国科学院大学海洋科学学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hiss006
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本研究利用从香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)EST数据库获得的ECSIT基因的EST序列,通过RACE技术扩增,获得了ChECSIT基因eDNA全长序列.ChECSIT的cDNA全长为1644bp,包括207bp的5-UTR,81 bp的3-UTR.该基因预测读码框(ORF) 1356bp,编码451个氨基酸.SMART分析表明,ChECSIT含有一个典型的ECSIT结构域.多重序列比对和系统进化分析显示ChECSIT与脊椎动物ECSIT具有较高的保守性.QRT-PCR(quantitative real time PCR)检测发现,香港牡蛎在不同微生物感染后表现出不同的应答模式:在V.alginolyticus刺激后,ChECSIT的mRNA水平在6h有一定的上升(正常水平的1.8倍),之后水平有所下降,到48h表达量又有所回升(正常水平的2.3倍);在S.haemolyticus刺激后,在24h表达水平显著上升(正常水平的4.8倍),在48h表达量有所下降(正常水平的2.1倍);在S.cerevisiae刺激后,在12h表达水平达到最高值(正常水平的18倍),随后在24h表达量有所下降(正常水平的12倍).这些结果暗示了ChSAA在香港牡蛎抗病原感染的过程中可能起着重要的作用.
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